Category: наука

Чтобы объяснить рак нужно стать научным изгоем

Проблемы с научным сообществом у Питера Дюсберга начались еще до того, как он заявил, что ВИЧ не вызывает СПИД. Дюсберг был первым, кто смог изолировать онкоген, но к началу 1980-х стал сомневаться, что онкогены как-то связаны с раком. 


После того, как Дюсберг подвергся обструкции, он смог пересмотреть бытовавшие в то время теории рака. Итогом этим размышлений и многолетних экспериментов стала сформулированная совместно с Д. Расником анеуплоидная теория рака, основанная на гипотезе, высказанной более 100 лет назад.  Данная теория ставит крест на патологической роли онкогенных ретровирусов, например, HTLV-1, HTLV-2, открытых в лаборатории Галло (считается, что через 40 или более лет после заражения эти вирусы иногда приводят к лимфоме).  


Вот что пишет про теорию анеуплодии Расник:


«Почти все из нас так или иначе связаны с раком. Страх общества перед раком сегодня равен страху перед чумой в Средние века. Это неудивительно, учитывая историю научных исследований в этой области.


Я пишу новую книгу, в которой я делюсь с вами продуктивными плодами 20-летнего путешествия, глядя на него с совершенно новой точки зрения ...


Моя цель состоит в том, чтобы прояснить тему, и это прояснение может быть подавляющим—даже для ученых—и в процессе заменить страх, насколько это возможно, силой знания. Единственный способ сделать это — действительно понять, как рак начинается и развивается, чтобы придумать эффективные методы лечения, которые не являются вредными.


Collapse )

Какое подтверждающее выделение вируса имеют право право требовать ВИЧ-положительные?

Не устану повторять, что ИФА/иммунный блот являются скрининговыми тестами, а ПЦР в том виде, который используется в ВИЧ-индустрии, - это просто издевательство над диагностикой.

Как можно доказать наличие ВИЧ в организме?

1. Взять плазму, медленным центрифугированием удалить "мусор"

2. Быстрым центрифугированием в градиентах плотности 20-60% раствора сахарозы очистить вирионы

3. Проверить активность обратной транскриптазы посредством соответствующих инструментов и наличие p24 посредством моноклональных антител во фракциях, соответствующих градиентам 1,16-1,17 г/мл

4. До лизирования очистить эти фракции РНКазой, потом протеазой

5. Очистить лизированные фракции из полос 1,16-1,17 г/мл от ДНК ДНКазой

6. Экстрагировать РНК

7. Разделить их по длине

8. Произвести long ОТ-ПЦР на праймерах, специфичных для 5' и 3'-концов последовательности ВИЧ для РНК размером около 9 Кб с учетом всех рекомендаций, позволяющих минимизировать возможную рекомбинацию.

9. Произвести секвенирование получившихся ДНК размером около 9 Кб

10. Произвести сравнение выравненных последовательностей с ВИЧ посредством blast alignment.

Подозреваю, что ВИЧ-инфекция не подтвердится у примерно 100%.

P.S. Скажут, что это дорого. Но это на порядки дешевле закупок АРТ на одного пациента.

Детектор квантового дерьма

Забавно. Взято отсюда http://round-the-world.org/?p=6490

В сообществе как бы учёных очень опасно открыто высказываться о бесконечной лжи и махинациях членов этого сообщества! Быстро отлучат от кормушки! Но не все же люди, входящие в это сообщество, лжецы или дебилы. Есть среди них честные и умные люди. И им хочется чтобы правду знали вне сообщества. Видимо, эта мысль толкнула одного из учёных, работающих на благо лженауки квантовой механики, выступить против своих коллег. Так на твиттеровскую сцену вышла таинственная виртуальная фигура под именем Quantum Bullshit Detector («Детектор квантового дерьма»). Статью об этом написала София Чэнь (Sophia Chen). (Здесь статья сокращена.)

В аккаунте «Детектор квантового дерьма» стали появляться анонимные посты с комментариями о мнимых прорывных достижениях в вычислениях с помощью квантовых компьютеров. Об этих «успехах» сегодня говорят очень много: что эта техника ускоряет алгоритмы искусственного интеллекта, управляет финансовыми рисками в банках и взламывает любую кодировку. Свое мнение этот аккаунт предпочитает выражать одним-единственным словом: «Дерьмо».

Collapse )

Дюйсберг жжет

«Лидеры ортодоксии СПИДа - это ветераны войн с «медленными» и раковыми вирусами. Естественно, они оказались достаточно квалифицированными, чтобы заполнить растущие пробелы в гипотезе вируса СПИДа, используя «современные концепции причинности», которые включают в себя длительные «латентные периоды», «кофакторы» и «сероэпидемиологические» аргументы причинности [речь об «эпидемии» на основе результатов тестов]. 

Когда стало очевидно, что механизм первого порядка вирусного патогенеза, постулирующий прямое уничтожение Т-клеток, не может объяснить иммунодефицит, ошеломляющее разнообразие заболеваний СПИДом, многие бессимптомные ВИЧ-инфекции и случаи ВИЧ-отрицательного СПИДа, научный метод потребовал бы новой гипотезы. Вместо этого охотники за вирусами сместили гипотезу о вирусе СПИДа с несостоявшегося механизма первого порядка на множество гипотетических механизмов второго порядка, включая кофакторы и латентные периоды, чтобы заполнить постоянно растущие расхождения между ВИЧ и СПИДом. Путем сопряжения этих механизмов второго порядка с множеством неродственных заболеваний гипотеза вируса СПИДа стала на сегодняшний день самой непредсказуемой гипотезой в биологии. Она предсказывает либо диарею, либо деменцию, либо саркому Капоши, либо отсутствие заболевания, через 1, 5, 10 или 20 лет после 1 или 2000 сексуальных контактов с ВИЧ-позитивным человеком, имеющим или не имеющим СПИД»

P. S. ВИЧ-наука похожа на псевдонауку психологию. В обеих можно объяснить взаимоисключающие вещи. Если некая как бы теория не может быть опровергнута в принципе, то есть нельзя придумать опровергающий эксперимент, то, согласно парадигме современной науки, эта теория не имеет признаков научности. Вчитайтесь в цитату Дюйзберга, в ней каждое слово попадает в цель. 

Извинения господину Шварцу

Shvarz: «Вы выполнили условия для продолжения разговора? Если нет, то вы не можете тут больше общаться. Как обещал - буду сначала тереть ваши комменты, будете настаивать - забаню.

Я имел в виду "написать о том, как вы облажались не понимая что такое клонирование и как я вас с большим терпением наставил на путь истинный»

Подтверждаю. Вот этот топик https://cryptopolicy.livejournal.com/26914.html полностью неверный. У Роберта Галло был только один вирус в градиенте, другим просто неоткуда было взяться. Ученый абсолютно правильно клонировал (одна бляшка — один клон, никак иначе, потому что более чем один фаг не может заразить бактерию, и бляшка всегда происходит ровно из одной клетки) и секвенировал этот вирус.

Кроме того, г-н Шварц весьма любезно просветил меня на тему того, что при лигировании в вектор не может попасть более чем одна вставка — это исключено. 

Не хотелось бы, чтобы вы, любезный г-н Шварц, терли мои комментарии, поэтому предлагаю продолжить тред https://shvarz.livejournal.com/340657.html?thread=12174513#t12174513.

Отсутствие антител к белкам ВИЧ у пациентов со СПИДом в опытах Монтанье и Галло


В работе Монтанье на картинке B, линия 1, совершенно четко видно, что антитела из сыворотки пациента BRU не реагируют с  белками сконцентрировавшихся в градиенте 1,16 "ретровируcных" частиц, которые были выделены из пациента BRU. Реагируют антитела только с белками из клеточного лизата (картинка A, линия 1).

Из статьи: Isolation of a T-Lymphotropic Retrovirus from a Patient at Risk for Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS)
Из статьи: Isolation of a T-Lymphotropic Retrovirus from a Patient at Risk for Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS)

В работах Галло точно также антитела из сыворотки пациентов со СПИДом реагировали не с белками ретровирусных частиц, сконцентрировавшихся в градиенте 1,16, а с белками из клеточного лизата (за одним исключением, о нем отдельно).

Тут следует обратить внимание на слово intracellular, то есть клетки лизировали, а не очищали вирус из супернатанта.

Из статьи: Frequent Detection and Isolation of Cytopathic Retroviruses(HTLV-III) from Patients with AIDS and at Risk for AIDS
Из статьи: Frequent Detection and Isolation of Cytopathic Retroviruses(HTLV-III) from Patients with AIDS and at Risk for AIDS

Далее больше деталей:

Из статьи:  Serological Analysis of a Subgroup of Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) Associated with AIDS
Из статьи: Serological Analysis of a Subgroup of Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) Associated with AIDS
Из статьи:  Serological Analysis of a Subgroup of Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) Associated with AIDS
Из статьи: Serological Analysis of a Subgroup of Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) Associated with AIDS

Зеленым цветом подчеркнул исключение, смотрим, что там в работе (19), а там на блотах с белками очищенного «вируса» у пациентов со СПИДом или с риском СПИДа (блоты 3, 4, 5, 6, 10, остальные блоты Галло не относит к СПИДу) видим только одну прореагировавшую полосу с молекулярной массой около 41 кДа. На этой полосе располагается человеческий белок актин,  который попадает в процессе очистки «вируса» в градиент 1,16 в составе клеточных обломков, как было показано позднее. 

Из статьи:  Antibodies Reactive with Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) in the Serum of Patients with AIDS
Из статьи: Antibodies Reactive with Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) in the Serum of Patients with AIDS
Из статьи:  Antibodies Reactive with Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) in the Serum of Patients with AIDS
Из статьи: Antibodies Reactive with Human T-Lymphotropic Retroviruses (HTLV-III) in the Serum of Patients with AIDS

Итого, в опытах Монтанье антитела из сыворотки пациента со СПИДом не реагировали с очищенным вирусом, а реагировали только с белками из клеточного лизата.

В опытах Галло антитела реагировали с белками из клеточного лизата и только с одним белком, который находился в градиенте 1,16 и этот белок — человеческий белок актин, который попадает в данную полосу плотности в составе клеточных обломков. 

Таким образом, либо ВИЧ абсолютно не иммуногенен (не вызывает выработку антител), либо в полосе плотности 1,16 не было вирусных белков. Нет белков — нет вируса.

P. S. Насмотревшись на представленные блоты с белками очищенного вируса и с белками клеток можно придти к выводу, что в современных иммуноблотах используется не очищенный «вирус» (как заявляется), а полный набор клеточных белков раковых клеток линии лимфомы, то есть лизируют не «вирус», а клетки. И в этих блотах нет ни одной специфической реакции. Имеющий глаза да увидит.

Нюансы в клонировании ВИЧ

При клонировании ВИЧ Р. Галло делал следующее:


(1) свежую культуру H9 (HUT-78) заражал супернатантом из культуры, в которой сокультивировались активированные лимфоциты 10 пациентов с признаками СПИДа с клетками H9 (Т-клетками пациента с лимфомой);


(2) проводил центрифугирование супернатанта зараженной культуры H9;


(3) проводил обратную транскрипцию всех poly(A)-РНК из частиц, сконцентрировавшихся в градиенте плотности 1, 16, сформировав таким образом библиотеку кДНК;


(4) экстрагировал из клеток low-weight ДНК, гибридизировал их с кДНК для проверки на наличие генома ВИЧ; 


(5)  загонял давшие сигнал low-weight ДНК в фаговый вектор;


(6) высевал клетки E.cori на питательной среде;


(7) заражал их сильно разведенным раствором с фагами, получившимися на шаге (5);


(8) после образования негативных фаговых колоний (фаговых бляшек) проводил их скрининг посредством гибридизации с кДНК;  


(9) отбирал давший сигнал клон (полноразмерный клон был назван BH-10). 




Однако, имеются данные, что:


(10) при ВИЧ-инфекции из плазмы можно получить вирионы HERV-K, которые концентрируются центрифугированием в градиенте 1, 16;


(11) стимулированные Т-лимфоциты в культуре экспрессируют вирионы HERV-K;


(12) экспрессированные частицы HERV-K переносят свою геномную НК и могут проникать в другие клетки;


(13) полный геном HERV-K примерно равен по размеру полному геному ВИЧ, поэтому их невозможно разделить по длине в геле.


Таким образом, на основе (10, 11, 12, 13) можно предположить, что в супернатанте (2) были вирионы HERV-K, которые попали в градиент плотности 1,16, и обратные транскрипты с генома которых попали в библиотеку кДНК (3), а неинтегрированные геномы (low-weight ДНК, 4) в фаговые векторы (5). 




Могли ли шаги (6 — 9) разделить ДНК ВИЧ и ДНК HERV-K, и не могла ли ДНК HERV-K попасть в фаги, образовавшие бляшку, из которой произошел клон BH-10?


Скрининг посредством кДНК (8) дал бы сигнал на бляшке, которая содержит только ДНК ВИЧ или только ДНК HERV-K или ДНК ВИЧ и ДНК HERV-K вместе. Поэтому скрининг не поможет выделить бляшку, которая содержит только ДНК ВИЧ.


Считается, что все фаги, образующие одну бляшку, имеют одинаковую вставку ДНК, то есть являются потомством одного фага.


Так ли это на самом деле? Подобным вопросом задается один исследователь здесь https://www.researchgate.net/post/How_to_determine_the_diversity_of_phage_display:


«I don't understand this part. I mean how do you know that in a single colony that you won't have different sequences. Why can't a single colony have more than one diversity (more than one sequence)?»


На это он получает такие ответы.


Ответ первый:


«... It is based on two main assumptions. None of them is 100% true


1. There is no more tan one inserted gene in each E.coli colony. Depending on the ratio between electrocompetent cells and plasmid DNA during transformation in library construction, and on the ratio between E.coli cells and phages during infection after selection rounds, this can be approximately true or not. when using large amounts of DNA/phages and not so many cells this assumption may be completely false.


2. Every colony contains a different DNA. In normal situations, its true that most colonies contain different DNAs, at least in the original library and probably after the first round of selection. Anyway, some colonies can be replicates of the same clone. After selection, diversity diverges from the number of colonies because enrichment means that the same clone is repeated multiple times.»


 И далее:


«Yes. Actually each colony is a pure strain because all the cells come from a single one. But this single cell can contain more than one phagemid (if an excess of DNA was used for electroporation, for instance) so cells in the progeny (same colony) can keep one of them, or even the whole mixture. It introduces some heterogeneity in the theoretically pure strain.»


Итого, в случае наличия HERV-K в градиенте (3) нет гарантий, что клон BH-10 состоит только из генома ВИЧ.  


Гетерогенность «теоретически чистого» клона способна привести к неточному секвенированию. Неточное секвенирование приводит к появлению неспецифических праймеров для ПЦР.  

В Австралии защищена диссертация, критически рассматривающая государственные программы вакцинации

Взято отсюда http://round-the-world.org/?p=1266

В Австралии защищена диссертация, критически рассматривающая государственные программы вакцинации и настаивающая на их изменении.

Вашему вниманию предлагаю перевод небольшой заметки в голландских новостях.

«Австралийский аспирант, вызвавшая ажиотаж в медицинском мире, написала диссертацию об ошибках в государственной программе вакцинации и фармацевтической промышленности. К большому неудовольствию медицинского истеблишмента, университет одобрил текст ее диссертации.
Так Judy Wilyman, видный деятель анти-вакцинационного движения, недавно стала обладателем титула «доктор философии» (Ph.D.).

Основные положения диссертации

Необычная научная работа Wilyman включает в себя следующие положения:

1. Объективного надзора за противопоказаниями или оценки эффективности вакцинации для населения, которая могла бы предоставить важные данные о последствиях вакцинации для населения, не существует.

2. ВОЗ не имеет никакого отношения к международному сообществу и контроль над ВОЗ осуществляется, исходя из интересов крупных корпораций и Всемирного банка.

3. Не существует подтвержденных научных доказательств, что те заболевания, для которых рекомендованы прививки, представляют серьезную угрозу здоровью большинства австралийских детей.

Collapse )

Redox регуляция иммунного ответа

Баланс между клеточным и гуморальным иммунитетом регулируется посредством окислительно-восстановительных процессов в иммунных клетках (redox). Окислители - это активные формы кислорода и азота (ROS и RNS). Восстановители - антиоксиданты, главный из которых глутатион. Именно данные молекулы отвечают за redox равновесие в клетках.

Подгруппа иммунных клеток клеточного иммунитета, так называемые антигенпрезентирующие клетки (АПК), которые активируют наивные Т-хелперы антигенами патогена, чувствительны к redox состоянию в системе. Если redox смещен к окислению, то они продуцируют цитокины, которые заставляют наивные T-хелперы дифференцироваться в Т-хелперы типа 2 (Th2), которые отвечают за активацию B-клеток, вырабатывающих антитела. В ином случае АПК вырабатывают цитокины, которые заставляют наивные Т-хелперы дифференцироваться в Т-хелперы типа 1, которые активируют Т-киллеры и макрофаги (клеточное звено иммунитета).

Клетки клеточного иммунитета для уничтожения патогена вырабатывают газ NO (оксид азота) и ROS в повышенных количествах. NO диффундирует через клеточные мембраны в виде NO- (RNS). Таким образом, при встрече патогена активируется клеточный иммунитет, Т-хелперы в основном представлены группой Th1, и появляется избыток ROS/RNS.

Collapse )

Обратная транскриптаза как репарационный фермент

В статье «How RNA transcripts coordinate DNA recombination and repair» показаны два механизма, посредством которых клетка восстанавливает разрывы в ДНК:

Один из этих механизмов ассоциируется с активностью обратной транскриптазы.